克伦特罗单克隆抗体的纯化及其生物学特性的研究

目的：将自制克伦特罗（CL）单克隆抗体纯化并研究其生物学特性,进行性质鉴定并建立检测标准曲线。方法：用ELISA法测定克伦特罗单克隆抗体的亲和常数和抗体活性,ELJSA测定单克隆抗体与BSA的交叉反应及与几种结构和功能类似物的交叉反应,然后采用间接竞争ELISA方法建立检测标准曲线。将制备的含克伦特罗单克隆抗体的小鼠腹水用盐析法和免疫亲和柱层析法进行抗体纯化。结果：经ELISA法测定,单克隆抗体亲和常数为2．90×10mmol／L,抗体效价最高达10^6。单克隆抗体对BSA无反应,对几种结构和功能类似物的交叉反应率均小于0．005％。建立的标准曲线R2=0．9812,最低检测限为1．0ng／ml。结论：建立了间接竞争ELISA检测cL的标准曲线。自制的克伦特罗单克隆抗体亲和力好,特异性高。为以后实际样品的检测及制备CL免疫检测试纸条和试剂盒奠定了基础。     

溶解有机质与铁氧化物相互作用过程对重金属再迁移的影响

水体中的溶解有机质(DOM)可与铁氧化物发生广泛的相互作用,进而对重金属再迁移产生重要影响,因而开展DOM与铁氧化物相互作用过程及其对重金属再迁移影响的实验研究,将有助于深化认识有毒重金属的迁移转化规律及其二次污染风险。本文对还原条件下不同浓度的DOM与铁氧化物的相互作用过程及其对重金属(Pb和As)再迁移的影响进行了研究。Pb、As浓度变化和铁氧化物絮体IR光谱分析结果表明:(1)DOM与铁氧化物的相互作用能明显增强还原环境下铁氧化物中Pb的再释放,并对As的再迁移产生一定的影响;(2)铁氧化物絮体主要通过Fe(III)与DOM中的羟基和羧基形成配位键而发生相互作用,Fe(III)易形成粒径更小的无定形铁氧化物,有利于铁氧化物的还原溶解,进而增强铁氧化物絮体中Pb、As的再释放;DOM使还原溶解后的Fe(II)难以形成二次沉淀矿物,不仅减弱了Pb、As再次进入固相的机会,而且溶解态Fe(II)浓度的增高能够进一步催化γ-FeOOH到α-FeOOH的相转化过程,进而促进铁氧化物絮体中Pb、As元素的再释放;此外,DOM还可以通过竞争吸附作用过程减弱铁氧化物对Pb、As的吸附,这可能也是溶液中Pb、As浓度增高的原因。本研究为进一步深化认识还原环境下重金属的二次污染风险,进而制定科学合理的水环境管理和保护措施提供了科学依据。     

乌梅酸枣仁提取物对人工感染鸡大肠杆菌病的防治效果

目的实验室评价乌梅酸枣仁提取物对鸡致病性大肠杆菌病的疗效。方法根据前期研究自拟乌梅酸枣仁提取物配方,以体外试管二倍稀释法测定其最小抑菌浓度（minimal inhibitory concentration,MIC）,建立鸡致病性大肠杆菌病模型,评价其预防和治疗鸡大肠杆菌病疗效。结果体外试验显示其最小抑菌浓度为12.5 mg/mL;人工感染鸡大肠杆菌病模型显示预防试验中乌梅酸枣仁提取物高、中、低剂量组、利好对照组、感染对照组的成活率分别为50%、70%、50%、60%、10%;肝脏细菌检出率均为100%。治疗试验中上述各组成活率分别为62.5%、50%、37.5%、62.5%、25%;肝脏细菌检出率均为100%。结论体外、体内试验结果表明,乌梅酸枣仁提取物能有效减少人工感染后的临床症状,保护率为50%～70%,推荐使用剂量为200 mg/kg体重,可以替代部分抗生素防治此病。     

蚜虫全蛋白提取方法的比较研究

为建立适于SDS-PAGE分析的蚜虫蛋白质样品制备平台,以便为蚜虫蛋白质的双向电泳分析奠定基础,本研究比较了TCA/丙酮沉淀、PEG提取、饱和酚抽提和直接裂解4种蛋白质提取方法.结果表明:不同样品制备方法的蛋白提取率有显著的差异,其中直接裂解法的提取率最高,为17.43 mg/g;其次是饱和酚抽提法,提取率为12.30 mg/g;而PEG制备法提取率最低,只有7.96 mg/g.利用SDS-PAGE电泳对不同的蛋白质样品进行了分析,发现在凝胶图谱上显现的条带也有明显的差异,其中饱和酚抽提法显现的条带数最多,为36条,且从14.4 kDa～116.0 kDa范围有广泛分布,条带清晰;PEG提取法条带数为30条,一些蛋白条带丢失或不明显;TCA/丙酮沉淀法的蛋白条带集中分布在25.0 kDa～67.0 kDa区域;直接裂解法条带数仅为24条,且小分子量的条带可辩率很低.通过以上结果可以得出,饱和酚抽提法最适用于蚜虫全蛋白样品的制备.     

生长分化因子11对甲醛诱导的海马神经细胞凋亡的影响

目的探讨生长分化因子11（GDF11）对甲醛诱导的海马神经（HT22）细胞毒性的影响。 方法把HT22细胞分为对照组（细胞未做任何处理）、甲醛组（50、100、200 μmol/ L甲醛处理细胞）和GDF11+甲醛组（GDF11转染细胞后用100 μmol/L甲醛处理）。细胞计数试剂盒（CCK8）法检测HT22细胞的活力;蛋白免疫印迹法检测HT22细胞凋亡相关蛋白Bax以及Bcl-2的变化;caspase-3活性检测试剂盒检测HT22细胞内caspase-3活性;DCFDA染色流式细胞仪检测HT22细胞中活性氧（ROS）水平。三组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。 结果与对照组比较,甲醛组HT22细胞活力（92.23±0.20比56.12±0.61）和Bcl-2蛋白表达（220.32±2.21比150.25±0.31）水平均降低,差异具有统计学意义（P均< 0.05）;而caspase-3活性（95.36±1.74比190.17±2.14）、Bax蛋白表达（132.19±1.21比150.17±1.06）和ROS水平（1099.32±75.47比2802.17±126.49）均升高,差异具有统计学意义（P均< 0.05）。GDF11转染HT22细胞后,与甲醛组比较,GDF11+甲醛组HT22细胞活力升高（56.12±0.61比83.11±1.64）,Bax蛋白表达（270.03±0.17比150.17±1.06）降低,Bcl-2蛋白表达（150.25±0.31比187.34±1.52）升高,caspase-3活性降低（190.17±2.14比105.31±4.12）和ROS水平降低（2802.17±126.49比1305.36±68.45）,差异具有统计学意义（P均< 0.05）。 结论GDF11能够逆转甲醛对HT22细胞凋亡的诱导作用以及降低甲醛对HT22细胞ROS水平的增加作用,此机制对防治甲醛的神经毒性具有重要意义。     

创刊十年寄语

生物产业已成为全球性战略新兴产业,是许多国家经济社会发展的战略重点和经济、科技竞争的焦点。世界各主要经济强国都把生物技术确定为21世纪经济与科技发展的关键技术,而工业生物技术作为生物技术的一个重要方面,具有绿色、可持续的特点,是发展低碳经济的关键技术。在我国,通过大力发展工业生物技术,可以构建新型产业结构和工业体系,实现资源、环境和社会的可持续发展。     

假互补肽核酸及其分子生物学效应

假互补肽核酸（pseudocomplementary peptide nucleic acids,pcPNAs）是肽核酸（peptide nucleic acids,PNA）的一种衍生物,通过碱基修饰可以使pcPNAs 同时与双链DNA两条链中相应的靶序列结合;而在pcPNAs识别靶序列并结合时,pcPNAs自身两条链间由于空间位阻作用,不会自身互补结合. pcPNAs与DNA、RNA甚 至肽核酸相比具有独特的杂交特性,因此具有非常广泛的分子生物学效应.本文就pcPNAs寡聚体的结构、与核酸杂交的特点及杂交模式,分子生物学效应以及应用等 方面进行介绍.     

麒麟丸联合炔雌醇环丙孕酮对多囊卵巢综合征致不孕症患者子宫内膜容受性、血清性激素和氧化应激水平的影响

摘要 目的：探讨麒麟丸联合炔雌醇环丙孕酮对多囊卵巢综合征（PCOS）致不孕症患者子宫内膜容受性、血清性激素和氧化应激水平的影响。方法：选取我院于2018年1月~2020年1月期间收治的PCOS致不孕症患者460例,符合要求的患者按照随机数字表法分为对照组和研究组,各为230例。对照组患者予以炔雌醇环丙孕酮治疗,研究组予以麒麟丸联合炔雌醇环丙孕酮治疗,对比两组疗效、子宫内膜容受性、性激素、氧化应激、排卵率、妊娠率和不良反应。结果：研究组的临床总有效率较对照组更高（P<0.05）。研究组治疗后子宫动脉搏动指数（PI）、子宫动脉血流阻力指数（RI）低于对照组,子宫内膜厚度大于对照组（P<0.05）。研究组治疗后促卵泡激素（FSH）和黄体生成素（LH）低于对照组,雌二醇（E2）高于对照组（P<0.05）。研究组治疗后丙二醛（MDA）、活性氧物质（ROS）低于对照组,过氧化物歧化酶（SOD）高于对照组（P<0.05）。随访6个月后,研究组的妊娠率、排卵率明显高于对照组（P<0.05）。两组不良反应发生率组间对比无差异（P>0.05）。结论：麒麟丸联合炔雌醇环丙孕酮治疗PCOS致不孕症患者,可以有效改善患者子宫内膜容受性、血清性激素和氧化应激状态,提高妊娠率、排卵率,安全有效。     

靶向纳米探针介导的近红外激光热疗

肿瘤靶向治疗的研究是当今生物医学界的研究热点.本研究采用整合素αvβ3单克隆抗体作为肿瘤靶向分子,以单壁碳纳米管(SWNT)作为运输载体,同时利用单壁碳纳米管在近红外区的光吸收特性,开展靶向肿瘤光热治疗.实验结果表明,这种整合素αvβ3单抗标记的碳纳米管探针对高表达αvβ3的U87MG细胞具有高靶向选择性和靶向光杀伤性...